科研产出
甘蓝型油菜BnADC基因的克隆及原核表达
《中国油料作物学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：利用同源克隆和RACE(Rapid amplification of cDNA ends)技术从甘蓝型油菜中克隆到精氨酸脱羧酶(Arginine decarboxylase,ADC)基因cDNA全长序列,命名为BnADC。BnADC全长为2 649bp,包含344bp的5'非翻译区(5'Untranslated region,5'-UTR)、226bp的3'非翻译区(3'Untranslated region,3'-UTR)和2 079bp的完整开放阅读框(open reading frame,ORF),编码75.1kD的蛋白质。5'-UTR中含有12bp的uORF(Upstream open readingframe),编码MIRE 4个氨基酸。氨基酸同源性比对表明,BnADC蛋白与其他植物ADC蛋白具有很高的相似性,与芥菜的同源性高达93%;系统进化树分析表明,BnADC与芥菜、拟南芥的ADC亲缘关系较近。在获得全长cDNA的基础上,构建融合表达载体pET30a(+)-BnADC,转化大肠杆菌(Escherichia coli)表达菌株BL21(DE3),SDS-PAGE检测到一个约81.1kD的融合蛋白被E.coil表达,且融合蛋白主要存在于菌体沉淀中。
重庆市梁平县水稻氮、磷、钾肥料施用效应研究
《西南农业学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：对重庆市梁平县24个乡镇,36个试验点进行了水稻"3414"施肥试验,研究分析了梁平县水稻的氮磷钾施肥技术,建立数字回归方程,寻找水稻的最佳施肥模式,为实现梁平县水稻生产的高产高线提供科学依据。结果表明:在低肥力土壤上N、P、K对水稻产量的影响大小顺序为N>K>P,在中、高肥力的土壤上表现为N>P>K;NP、NK、PK对水稻产量的交互效应均表现为正交互效应;在试验区低肥力土壤中,试验区水稻的最佳施肥配比为N∶P2O5∶K2O=1∶0.4～0.6∶0.4～0.6;在中肥力土壤中,其最佳施肥配比为N∶P2O5∶K2O=1∶0.6∶0.6;在高肥力土壤中,其最佳施肥配比为N∶P2O5∶K2O=1∶0～0.6∶0～0.6。
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无患子组培过程中愈伤组织诱导和芽苗增殖的培养基配方研究
《西南农业学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：为探讨大量元素和植物激素对无患子愈伤组织诱导和芽苗增殖的影响并优化培养基组成,试验采用正交设计研究了不同浓度的大量元素、BA和NAA对无患子茎段培养的影响,并对试验数据进行极差分析和方差分析。结果表明BA在无患子茎段愈伤组织诱导和芽苗增殖中起主要作用,其次为MS大量元素,NAA无明显作用。全量MS和2.0 mg·L-1的BA最适于无患子茎段上愈伤组织的诱导与再分化以及芽苗的增殖和伸长;MS大量元素含量降低、BA和NAA浓度增加均不利于无患子离体培养物的生长,这在愈伤组织的再分化上表现尤为显著。无患子茎段培养的最适培养基是MS+BA 2.0 mg·L-1+NAA 0.01 mg·L-1,本试验中MS+BA 2.0 mg·L-1+NAA 0.05 mg·L-1即2号培养基为最佳组合。
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查尔酮合酶蛋白表达技术、结构、活性和进化
《西南农业学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：查尔酮合酶(CHS)是类黄酮途径的首步关键酶,参与合成所有类黄酮和异黄酮物质,参与决定多种植物重要性状。NCBI已有2917条CHS序列登录和释放。单个物种基因组中的CHS普遍由基因家族编码,通过基因加倍而产生。CHS蛋白的表达技术目前均是基于大肠杆菌的原核表达,多采用Novagen公司的pET载体系统,最通行参数为37℃条件下1 mmol/L IPTG诱导3h,表达蛋白普遍采用His-Tag进行亲和纯化,采用质谱或免疫分析技术进行身份检测,通过对生化反应底物和产物的HPLC检测可以精确分析酶活。苜蓿等植物的CHS蛋白已完成X射线晶体衍射研究,获得了三维结构和活性位点构象的初步解析,并与植物Ⅲ型PKS超家族中的其它酶类进行了比较。CHS蛋白的催化活性中心含有一个Cys-His-Asn三联体,另外CoA结合通道和内部的起始/延伸/环化腔关系到CHS蛋白的底物特异性及聚酮化合物链延伸的长度。植物Ⅲ型PKS超家族中,其它酶的结构骨架和催化方式与CHS相似,但活性位点残基的变化可能会造成活性中心结构的改变,进而产生底物特异性、催化能力和产物种类的显著变化,是蛋白水平进化的根本动力。
关键词： 查尔酮合酶(CHS) 植物Ⅲ型PKS超家族 原核表达 结构 活性
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西南丘陵区标准化蔬菜基地规划与工程设计研究
《西南农业学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要："菜篮子"工程是事关民生的基础工程,各级政府高度重视,蔬菜基地标准化建设对于蔬菜产业可持续发展尤为重要。本文结合重庆市璧山县璧北蔬菜基地核心示范区建设实例,宏观阐述标准化蔬菜基地建设必须遵循可持续农业方向,符合生态化,设施化,观光休闲化,生加销一体化的发展趋势,。微观探讨工程设计要点,确定条田设计方法和主要灌排形式,即地形起伏较大时,条田田块适宜局部平整,条田规划首先满足灌溉和机耕要求,田间灌渠采用横向布置形式;而地形相对平坦时,则适合大规模的耕作区划分,应更多考虑排水问题,田间灌渠采用灌排结合纵向布置形式。因此,以标准化蔬菜基地产业建设为目标的规划设计必须立足其复杂多样的立地条件和功能分区差异,配套不同的土地平整和灌排体系工程,实现土地资源的高效利用。
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配方施肥对白背飞虱种群动态影响的研究
《西南农业学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：为了探索武陵山区氮、磷、钾化肥配方施用对白背飞虱种群动态的影响,更好地预测和防治白背飞虱,搞好测土配方施肥技术的推广,2008～2010年在重庆市秀山县水稻示范片的配方施肥区和"3414"小区肥效试验田进行了研究。结果表明:相对于习惯施肥,配方施肥对白背飞虱种群数量具有较好控制效果;氮素化肥对白背飞虱种群数量有很大促进作用,磷、钾化肥在一定用量内对白背飞虱有促进作用,但达一定用量后,则对白背飞虱种群数量有一定抑制作用;3大肥料元素中,氮对白背飞虱种群的影响具有决定性作用。因此,通过肥料的合理配施,则能发挥配方施肥对白背飞虱种群数量的控制作用。
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加工型辣椒花药培养技术研究
《中国农学通报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：为了满足重庆辣椒高效育种与良种创新的需要,以2个加工型辣椒材料578和186及一个甜椒品种‘海丰28’为试材进行花药培养研究。研究了预处理与预培养的时间与温度,并通过正交试验设计,探讨了基本培养基、植物生长调节物质、活性炭、硝酸银、碳源等主要因子对辣椒花药培养的影响。结果表明,高温预培养35℃7天时辣椒578、186、甜椒‘海丰28’的植株诱导率分别为4.86%、2.50%、0.56%,是对3种材料都适合的预培养条件。通过正交试验分析得到对2个基因型特异的优化培养基配方,并且通过比较得到一个对2个基因型都较适合的培养基配方。对花药培养再生的植株进行倍性鉴定,证明3个基因型均得到了具有12条染色体的单倍体植株。以饱和对二氯苯与0.2%秋水仙素浸泡生长点24h进行加倍,成功获得了双单倍体植株。
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