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蜡梅金属硫蛋白基因的克隆与原核表达

文献类型: 中文期刊

作者: 秦平伟 1 ; 段明革 2 ; 孙文婷 3 ; 李名扬 4 ; 徐晶 5 ;

作者机构: 1.重庆市农业科学院生物技术研究中心

2.重庆市花卉工程技术研究中心

3.西南大学园艺园林学院重庆市花卉工程技术研究中心南方山地园艺学教育部重点实验室

4.西南大学园艺园林学院

5.西南大学园艺园林学院重庆市花卉工程技术研究中心重庆城市管理职业学院

关键词: 金属硫蛋白;克隆;序列分析;原核表达

期刊名称: 北京林业大学学报

ISSN: 1000-1522

年卷期: 2010 年 S2 期

页码: 177-181

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 金属硫蛋白(metallothionein,MT)是一类富含Cys,能够结合重金属的低分子量蛋白质,广泛分布于生物界。在构建好的蜡梅花cDNA文库并进行EST分析的基础上,通过随机克隆测序得到了1个蜡梅金属硫蛋白的cDNA,命名为CpMetallothionein(CpMT)。CpMTcDNA全长为1083bp,基因内部含有一长度为240bp的开放阅读框,可编码79个氨基酸残基。将CpMT插入原核表达载体pET-32a,并转化Origami2感受态细胞。诱导表达产物经SDS-PAGE结果显示,目的蛋白约为30kD。表达的融合蛋白以包涵体和可溶性蛋白2种形式存在,用His-Bind蛋白纯化回收试剂盒对其进行纯化回收,得到了高纯度蛋白,为今后研究奠定基础。

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