科研产出
胱硫醚-β-合成酶的高效表达及酶学性质研究
《湖北农业科学 》 2024 北大核心
摘要：以酿酒酵母的cbs基因序列为模板，依据大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)的密码子偏好性进行密码子优化，以pET28a（+）为骨架构建表达质粒pET28a-cbs，并利用Escherichia coli BL21(DE3)进行胱硫醚-β-合成酶（CBS）的表达，同时优化诱导表达条件并分析CBS的酶学性质。结果表明，在诱导温度为16℃、IPTG浓度为0.1 mmol/L、诱导时间为18 h时，CBS浓度最高，为266.67 mg/L。CBS发挥催化作用过程中也受到多种环境因素的影响，在40～55℃时，CBS相对酶活性迅速下降，CBS不适宜长期保存于温度大于40℃的环境中；CBS适宜长期保存于pH为6.5～8.5的缓冲溶液中，不宜保存在过酸或过碱的缓冲溶液中；CBS在温度40℃、pH 8.0条件下，酶活性较高。
关键词： 胱硫醚-β-合成酶(CBS) 高效表达 酶学性质 诱导表达
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茶原料中纤维素酶的酶学性质及其应用研究
《西南农业学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：以富含纤维素酶的茶叶半成品为原料试制速溶茶。首先采用单因素试验方法分析了此酶的酶学性质,再通过正交设计优化了速溶茶的浸提条件。结果表明,此纤维素酶适合在30~60℃、p H 3.5~5.5范围内反应;在30~40℃范围、p H 3.0~5.0范围内较稳定;50℃保温60 min后残余酶活为40%。浸提温度60℃、液固比20、浸提50 min为速溶茶的最佳浸提条件,茶汤中茶多酚浸出率达85.6%,与原料相比,氨基酸、可溶性糖、咖啡碱含量显著提高23.7%、6.3%、2.9%,水浸出率达96%。
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