您好，欢迎访问重庆市农业科学院 机构知识库！

苏云金芽孢杆菌Cry1A.301-Vip3A融合杀虫蛋白原核表达及生物活性分析

文献类型： 中文期刊

作者： 杨小艳 1 ; 韩垚 1 ; 吴红 1 ; 雷开荣 1 ; 谢树章 1 ;

作者机构： 1.重庆市农业科学院生物技术研究所/逆境农业研究重庆市市级重点实验室

关键词： 苏云金芽孢杆菌(Bt);融合蛋白;原核表达;生物活性

期刊名称： 南方农业学报

ISSN： 2095-1191

年卷期： 2024 年 55 卷 010 期

页码： 3046-3055

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】对苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis,Bt）的杀虫蛋白基因（Cry1A.301和Vip3A）进行原核融合表达及生物活性分析，为玉米抗虫基因资源发掘和品种创制提供科学参考。【方法】利用连接肽构建不同杀虫机理的Cry1A.301和Vip3A融合基因，构建其原核表达载体，在大肠杆菌中进行诱导表达，对融合蛋白进行理化性质和结构域预测分析及定量检测，并采用人工饲料混合饲喂法测定融合蛋白对亚洲玉米螟（Ostrinia furnacalis）、棉铃虫（Helicoverpaarmigera）和草地贪夜蛾（Spodopterafrugiperda）的杀虫活性。【结果】构建的融合基因基本骨架为5'-Cry1A.301-Vip3A-3'，中间由编码连接肽（8个氨基酸）的核苷酸序列（TCCACCTGCTCCACCTGCTCCACC）组装而成，经诱导表达形成融合蛋白Cry1A.301-Vip3A。该融合蛋白含有1409个氨基酸，分子量约为157 kD，为稳定的酸性蛋白，包含Cry1A.301和Vip3A蛋白家族的4个特征结构域。Cry1A.301-Vip3A融合蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)细胞中成功表达，且Cry1A.301和Vip3A蛋白的表达量无显著差异（P>0.05，下同）。饲喂Cry1A.301-Vip3A融合蛋白7 d后，亚洲玉米螟、草地贪夜蛾和棉铃虫幼虫校正死亡率达100.00%。Cry1A.301-Vip3A融合蛋白与Cry1A.301蛋白对亚洲玉米螟的杀虫活性无显著差异，均显著高于Vip3A蛋白（P<0.05，下同）。Cry1A.301-Vip3A融合蛋白、Vip3A蛋白和Cry1A.301蛋白对棉铃虫的杀虫活性无显著差异。Cry1A.301-Vip3A融合蛋白和Vip3A蛋白对草地贪夜蛾的杀虫活性无显著差异，均显著高于Cry1A.301蛋白。【结论】原核表达的Cry1A.301-Vip3A融合蛋白结构稳定，对亚洲玉米螟、棉铃虫和草地贪夜蛾均具有较好的杀虫活性。

  • 相关文献

[1]甘蓝型油菜BnADC基因的克隆及原核表达. 洪林,闫晓红,袁亚宾,刘王辉,胡长清,李晨,陈春丽,魏文辉. 2012

[2]查尔酮合酶蛋白表达技术、结构、活性和进化. 陈俊毅,柴友荣,姚永宏. 2012

[3]蜡梅几丁质酶基因的克隆与原核表达. 谢树章,秦平伟,张迷,胡雨晴,李名扬,眭顺照. 2009

[4]蜡梅金属硫蛋白基因的克隆与原核表达. 秦平伟,段明革,孙文婷,李名扬,徐晶. 2010

作者其他论文 更多>>
置顶
购物车
反馈

© 京ICP备09089781号-29 主办单位：重庆市农业科学院

学术资源： 中国农业科学院 农业专业知识服务系统 农科联盟资源共建共享平台 中国农业科技文献与信息服务平台 中国农业期刊集成服务平台