梨黑斑病抗病相关基因PpEMS1的克隆与分析

段敏杰; 伊洪伟; 王进; 武峥; 《生物技术通报 》 2019 北大核心 CSCD

摘要：克隆梨抗病相关基因,并对其在梨黑斑病抗病防御中的作用进行初步分析.基于同源基因克隆方法从"黄冠梨"中克隆获得一个预测为受体样蛋白激"酶EMS1的基因,暂命名为PpEMS1.利用生物信息学、Southern Blot、亚细胞定位和实时荧光定量PCR技术对该基因进行分析.结果表明,该基因CDS全长3894 bp,编码1296个氨基酸,开放阅读框3891 bp.Southern Blot分析表明,在"黄冠梨"、"黄花梨"、"翠玉梨"中,该基因都以单拷贝形式存在,在"爱宕梨"中以多拷贝形式存在.亚细胞定位结果显示,融合蛋白在细胞膜和细胞核均有表达.荧光定量PCR分析表明,接种黑斑病菌1、2、3、4、5、6、7和8 d后,在"黄花梨"和"爱宕梨"中该基因表达均呈现先上升后下降的趋势.推测该基因可能与梨黑斑病抗性相关.

关键词： 梨 PpEMS1 SouthernBlot 荧光定量PCR 亚细胞定位