胱硫醚-β-合成酶的高效表达及酶学性质研究

陈武; 刘春华; 何鹏辉; 蔡冬波; 陈守文; 王冬; 《湖北农业科学 》 2024 北大核心

摘要：以酿酒酵母的cbs基因序列为模板，依据大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)的密码子偏好性进行密码子优化，以pET28a（+）为骨架构建表达质粒pET28a-cbs，并利用Escherichia coli BL21(DE3)进行胱硫醚-β-合成酶（CBS）的表达，同时优化诱导表达条件并分析CBS的酶学性质。结果表明，在诱导温度为16℃、IPTG浓度为0.1 mmol/L、诱导时间为18 h时，CBS浓度最高，为266.67 mg/L。CBS发挥催化作用过程中也受到多种环境因素的影响，在40～55℃时，CBS相对酶活性迅速下降，CBS不适宜长期保存于温度大于40℃的环境中；CBS适宜长期保存于pH为6.5～8.5的缓冲溶液中，不宜保存在过酸或过碱的缓冲溶液中；CBS在温度40℃、pH 8.0条件下，酶活性较高。

关键词： 胱硫醚-β-合成酶(CBS) 高效表达 酶学性质 诱导表达