科研产出
根癌农杆菌介导GUS基因转化玉米芽尖生长点的研究
《植物生理学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：本试验以玉米(Zea mays)杂交种‘郑单958’的芽尖生长点作为农杆菌侵染受体,以β-葡萄糖醛酸苷酶基因(GUS)作为转化基因,吸水链霉菌草丁膦乙酰转移酶基因(bar)作为筛选标记基因,通过GUS颜色反应,分别从侵染液浓度、侵染时间和真空处理时间三个方面分析了影响GUS基因转化率的因素,初步得出结论:当侵染液浓度(OD600)为0.6、侵染时间2 h、真空处理时间为10 min时,选用杂交种‘郑单958’作为受体材料将会达到较高的遗传转化率。
关键词： 玉米 芽尖生长点 GUS基因 根癌农杆菌 遗传转化
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转Cry1Ab-Ma基因抗虫玉米植株的获得及其后代分析
《分子植物育种 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：本研究使用In-Fusion TM试剂盒构建植物表达载体p TF101.1-P35S::Cry1Ab-Ma,以玉米杂交种HiⅡ幼胚为受体材料,采用农杆菌介导法将P35S驱动的抗虫基因Cry1Ab-Ma基因转入玉米,经双丙氨膦筛选后的抗性愈伤分化出43株玉米幼苗,经目的基因PCR及表达蛋白检测,其中的28株呈阳性。T1代植株叶片蛋白粗提物经Cry1Ab免疫试纸条检测,结果表明目的基因表现出分离,在部分转基因植株后代中获得了表达。本研究为培育优良的抗虫玉米自交系奠定了基础。
关键词： 玉米 Cry1Ab-Ma基因 载体构建 遗传转化
农杆菌介导抗虫基因GmCry1F转化玉米的研究
《西南农业学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：培育转基因抗虫玉米是防治玉米螟虫的有效途径之一。本研究通过对来源于苏云金芽孢杆菌Cry1F野生型基因编码区密码子优化改造获得新型抗虫基因Gm Cry1F,使用农杆菌介导的玉米幼胚遗传转化法将目的基因转入玉米材料Hi-II,最后应用PCR法与蛋白免疫学法对试验结果进行鉴定检测。结果表明:成功构建了植物表达载体CUB-ubi::Gm Cry1F-35s::bar,经光照培养分化获得到转化苗25株,其中有17株的PCR和试纸条检测均呈阳性,说明Gm Cry1F基因已经整合到玉米基因组中。这一研究结果为下一步开展转基因抗虫玉米育种工作提供了较好的研究材料,也为玉米抗虫基因工程育种研究提供参考。
关键词： 玉米 抗虫基因 Gm Cry1F 载体构建 遗传转化
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冷诱导转录因子CBF3转化茄子的初步研究
《中国蔬菜 》 2013 北大核心
摘要：成功构建了含冷诱导转录因子CBF3(CRT binding factor)的植物表达载体,通过农杆菌介导法转入三月茄,采用PCR检测DNA和卡那霉素涂抹叶片法进行田间抗性鉴定,证实获得含抗寒基因CBF3的茄子转基因植株2株,建立了抗寒的茄子再生与转化技术体系.
关键词： 茄子 冷诱导转录因子CBF3 遗传转化
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玉米精氨酸酶基因过表达载体的构建与遗传转化分析
《玉米科学 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：精氨酸酶是氮素循环中催化精氨酸生成鸟氨酸和尿素的重要酶,可促进氮素的再利用,提高氮素的利用效率。依据Genbank(登陆号:HM369061.1)中水稻精氨酸酶的基因序列,应用RT-PCR方法同源克隆玉米自交系郑58中的精氨酸酶基因ZmArg。序列比对结果表明,克隆的ZmArg基因与GenBank中Zea mays PCO068984 mRNA(B73)序列相似度为99.9%;利用In-fusion技术构建该基因的植物过表达载体pCAMBIA5300-Ubi-ZmArg,导入农杆菌LBA4404用于玉米遗传转化,采用农杆菌侵染玉米芽尖方法转化早熟玉米自交系K10,获得T0代PCR阳性植株27株,其中18株收获种子;对T1代10个PCR阳性株系进行产量比较试验,4个株系百粒重和单株产量明显提高。
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